ANTISPUBLISHERANTISPUBLISHER
Journal of Medical Genetics and Clinical BiologyJournal of Medical Genetics and Clinical BiologyTujuan penelitian ini adalah untuk mendefinisikan faktor-faktor molekuler dan struktural yang menentukan selektivitas LPCAT3 terhadap arachidonoyl-CoA dan preferensinya untuk memasukkan asam arachidonat pada posisi sn-2 dari lisofosfolipid. Metode yang digunakan adalah ekspresi LPCAT3 pada sel mamalia, dan fraksi membran digunakan untuk analisis kinetika keadaan tetap dengan 1- dan 2-acyl-lisofosfatidilkolin dan donor acil-CoA yang berbeda. Mutagenesis yang dipandu struktur menargetkan residu terowongan dan kantong samping (L217A, F265A, L217A/F265A, H376A). Docking dan dinamika molekular dilakukan pada LPCAT3 liar dan mutan. Sel-sel yang kekurangan LPCAT3 kemudian dikomplementasi dengan varian yang dipilih dan dianalisis menggunakan lipidomika pelacakan isotop dan pembacaan fungsional. Hasil penelitian menunjukkan bahwa LPCAT3 liar menunjukkan efisiensi katalitik maksimal untuk arachidonoyl-CoA (Km 5,2 ± 0,8 µM, kcat/Km ditetapkan sebagai 1,0) dan efisiensi yang lebih rendah untuk 22:6-, 18:1- dan 16:0-CoA (kcat/Km relatif 0,70, 0,40, dan 0,25, masing-masing). Tingkat awal terhadap 1-acyl-lisofosfatidilkolin sekitar lima kali lebih tinggi daripada untuk 2-acyl-lisofosfatidilkolin, dengan 92 ± 3% dari arachidonat yang terinkorporasi berada di posisi sn-2. Mutasi L217A, F265A, dan L217A/F265A meningkatkan Km untuk arachidonoyl-CoA hingga sekitar 25 µM dan mengurangi kcat/Km relatif menjadi 0,10, sambil mengurangi pengayaan sn-2 menjadi sekitar 55-65%. Pada sel yang kekurangan LPCAT3, arachidonoyl-PC total meningkat dari 0,11 ± 0,02 (vektor) menjadi 0,41 ± 0,04 (liar) tetapi hanya menjadi 0,17-0,24 dengan mutan terowongan/kantong samping. Keunikan penelitian ini adalah terowongan acil-CoA dan kantong samping hidrofobik LPCAT3 berfungsi sebagai alur struktural rantai asam arachidonat yang bengkok untuk mengikatnya dengan afinitas tinggi dan penempatan spesifik pada posisi sn-2. Gangguan arsitektur ini mengurangi pengembangan arachidonoyl-PC dan kemampuan sinyal lipid hilir, yang menunjukkan bahwa LPCAT3 adalah persimpangan mekanistik dalam mengatur konten membran PUFA dan sinyal yang tergantung pada arachidonat.
Penelitian ini menjelaskan mekanisme di mana LPCAT3 mendiskriminasi terhadap memasukkan arachidonoyl-CoA ke dalam fosfatidilkolin selama pemodelan ulang fosfolipid dan alasan mengapa proses ini sangat condong pada situs sn-2.Sebuah rangkaian determinan di terowongan donor acil dan kantong samping, yang secara selektif mengenali struktur bengkok asam arachidonat, diidentifikasi menggunakan metode yang menggabungkan ekspresi rekombinan, kinetika kuantitatif, mutagenesis yang dipandu struktur, pemodelan molekular, dan lipidomika seluler.Mutasi yang diprediksi di daerah-daerah ini mengganggu afinitas arachidonoyl-CoA, efisiensi katalitik, dan selektivitas posisional, menyarankan bahwa LPCAT3 adalah cetakan stereokimia yang cocok dengan donor dan penerima substrat untuk memfasilitasi reaksi transfer acil sn-2 yang sukses.Sejalan dengan mekanisme ini, sel-sel yang mengekspresikan versi yang terganggu selektivitasnya menunjukkan pengayaan spesies arachidonoyl-PC yang berkurang dan keluaran hilir yang berkurang yang terkait dengan ketersediaan arachidonat, seperti pelepasan mediator lipid yang diinduksi stimulus dan kerentanan terhadap peroksidasi lipid.Secara kolektif, hasil-hasil ini menghubungkan struktur LPCAT3 dengan kinetika pemodelan ulang dan homeostasis fosfolipid arachidonoyl seluler.Struktur mekanistik ini akan digunakan untuk mendukung penargetan rasional LPCAT3 untuk menyesuaikan komposisi PUFA membran dan fenotipe terkait peradangan, metabolik, dan jenis ferroptosis.
Berdasarkan hasil penelitian ini, ada beberapa saran penelitian lanjutan yang dapat dilakukan. Pertama, penelitian lebih lanjut dapat dilakukan untuk menyelidiki implikasi fisiologis dan patologis dari LPCAT3 dalam mengatur proses penting dalam tubuh, seperti lipoprotein metabolisme, stres ER, peradangan, dan resistensi insulin. Kedua, studi longitudinal pada penyakit metabolik dan peradangan, serta ferroptosis di hati dan usus, dapat dilakukan untuk menguji apakah penargetan farmakologis kantong samping LPCAT3 dapat dengan aman mengubah konten arachidonoyl-PC, sintesis eicosanoid, dan kerentanan terhadap ferroptosis dalam kondisi klinis yang relevan. Ketiga, strategi ini dapat diterapkan pada isoform LPCAT lainnya untuk menentukan apakah motif struktural serupa merupakan dasar dari preferensi rantai acil mereka yang berbeda dan apakah dengan membuat model knock-in hewan dengan mutasi terowongan atau kantong samping yang halus yang dapat secara selektif mempengaruhi selektivitas posisional, tetapi tidak aktivitas. Model-model ini kemudian harus dikombinasikan dengan studi longitudinal untuk menguji apakah penargetan kantong samping LPCAT3 dapat secara aman mengubah komposisi PUFA membran dan fenotipe terkait peradangan, metabolik, dan jenis ferroptosis.
- Deficiency in Lysophosphatidylcholine Acyltransferase 3 Reduces Plasma Levels of Lipids by Reducing Lipid... gastrojournal.org/retrieve/pii/S0016508515010069Deficiency in Lysophosphatidylcholine Acyltransferase 3 Reduces Plasma Levels of Lipids by Reducing Lipid gastrojournal retrieve pii S0016508515010069
- Small Intestine but Not Liver Lysophosphatidylcholine Acyltransferase 3 (Lpcat3) Deficiency Has a Dominant... jbc.org/retrieve/pii/S0021925820413171Small Intestine but Not Liver Lysophosphatidylcholine Acyltransferase 3 Lpcat3 Deficiency Has a Dominant jbc retrieve pii S0021925820413171
- Phospholipid Remodeling in Physiology and Disease | Annual Reviews. phospholipid remodeling physiology... doi.org/10.1146/annurev-physiol-020518-114444Phospholipid Remodeling in Physiology and Disease Annual Reviews phospholipid remodeling physiology doi 10 1146 annurev physiol 020518 114444
| File size | 1.28 MB |
| Pages | 19 |
| DMCA | Report |
Related /
STIT ALKIFAYAHRIAUSTIT ALKIFAYAHRIAU Data penelitian ini dikumpulkan melalui teknik observasi guru dan aktivitas anak dan dokumentasi. Setelah data terkumpul melalui observasi, data tersebutData penelitian ini dikumpulkan melalui teknik observasi guru dan aktivitas anak dan dokumentasi. Setelah data terkumpul melalui observasi, data tersebut
STIT ALKIFAYAHRIAUSTIT ALKIFAYAHRIAU Aktivitas guru meningkat signifikan dari 40% pada data awal menjadi 90% pada siklus II pertemuan 2, menunjukkan peningkatan kualitas pelaksanaan pembelajaranAktivitas guru meningkat signifikan dari 40% pada data awal menjadi 90% pada siklus II pertemuan 2, menunjukkan peningkatan kualitas pelaksanaan pembelajaran
PLJPLJ Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh kualitas produk dan harga terhadap kepuasan pelanggan pada Mixue. Mixue merupakan salah satu merek minumanPenelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh kualitas produk dan harga terhadap kepuasan pelanggan pada Mixue. Mixue merupakan salah satu merek minuman
STIKESMUCISSTIKESMUCIS Malnutrisi akan berdampak negatif pada pertumbuhan fisik dan mental yang kemudian akan menghambat pencapaian prestasi belajar. Pada masa balita, pertumbuhanMalnutrisi akan berdampak negatif pada pertumbuhan fisik dan mental yang kemudian akan menghambat pencapaian prestasi belajar. Pada masa balita, pertumbuhan
STIT ALKIFAYAHRIAUSTIT ALKIFAYAHRIAU Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui kemampuan berbicara anak sebelum, proses, dan sesudah menggunakan media pop-up book pada setiap siklus diTujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui kemampuan berbicara anak sebelum, proses, dan sesudah menggunakan media pop-up book pada setiap siklus di
STIT ALKIFAYAHRIAUSTIT ALKIFAYAHRIAU Kompleks jangka panjang maupun jangka pendek, anak semakin lama akan bosan dengan gadgetnya. Dengan keberadaan gadget seluruhnya senantiasa sangat cepatKompleks jangka panjang maupun jangka pendek, anak semakin lama akan bosan dengan gadgetnya. Dengan keberadaan gadget seluruhnya senantiasa sangat cepat
STIT ALKIFAYAHRIAUSTIT ALKIFAYAHRIAU Hasil penelitian menunjukkan nilai rata-rata pre-test dan post-test pada kelas eksperimen adalah 20,15 dan 27,38, serta 20,62 dan 25,00 pada kelompok kontrol.Hasil penelitian menunjukkan nilai rata-rata pre-test dan post-test pada kelas eksperimen adalah 20,15 dan 27,38, serta 20,62 dan 25,00 pada kelompok kontrol.
STIT ALKIFAYAHRIAUSTIT ALKIFAYAHRIAU Hasil observasi setiap aktivitas dan unjuk kerja mengalami peningkatan, Dengan demikian memperoleh keisimpulan bahwa implementasi etoode bermain peranHasil observasi setiap aktivitas dan unjuk kerja mengalami peningkatan, Dengan demikian memperoleh keisimpulan bahwa implementasi etoode bermain peran
Useful /
ANTISPUBLISHERANTISPUBLISHER The PEDF/VEGF index did not correlate significantly with oocyte factors, including retrieval, metaphase II, and maturation rate. However, significant correlationsThe PEDF/VEGF index did not correlate significantly with oocyte factors, including retrieval, metaphase II, and maturation rate. However, significant correlations
ARIPIARIPI Mayoritas pengunjung Kolam Renang Tirta Indah secara keseluruhan merasa puas, meskipun ada ketidakpuasan terkait harga makanan dan minuman di kantin yangMayoritas pengunjung Kolam Renang Tirta Indah secara keseluruhan merasa puas, meskipun ada ketidakpuasan terkait harga makanan dan minuman di kantin yang
4141 The study aims to dry fresh seaweed at various temperatures and to observe the color characteristics of seaweed and water activity after drying and countingThe study aims to dry fresh seaweed at various temperatures and to observe the color characteristics of seaweed and water activity after drying and counting
IAIN SUIAIN SU Secara historis, dayah dikenal telah melahirkan banyak ulama dari berbagai disiplin ilmu, sehingga akan menarik untuk mengkaji perkembangan budaya akademikSecara historis, dayah dikenal telah melahirkan banyak ulama dari berbagai disiplin ilmu, sehingga akan menarik untuk mengkaji perkembangan budaya akademik